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如何平衡色谱柱?
点击次数:6132 更新时间:2007-01-31

平衡过程中,将流速缓慢地提高 
       用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂度如果较低,则需要较长的时间来平衡)

         色谱柱的再生   进行色谱柱再生时,应使用一个谦价的泵,我们建议不使用您的液相色谱仪上的泵。 
     表1 建议用来冲洗的溶剂体积
     色谱柱尺寸 柱体积 所用溶剂的体积 
      125-4 1.6ml 30ml

    250-4 3.2ml 60ml

   250-10 -20ml 400ml


     请根据下表选择您的再生方法:


     极性固定相(如Si,NH2*,DIOL基色谱填料)的再生:


     正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水**


     非极性固定相(如反相色谱填料RP-18,RP-8,CN等)的再生:


     水→乙腈→氯仿(或异丙醇)→乙腈→水

    0.05M稀硫酸可以用来清洗已污染的色谱柱 

  注意:


     在对NH2改性的色谱柱进行再生时,由于NH2可能成铵根离子的形式存在,因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗,然后再用水冲洗至碱溶液*流出。


     **如果简单的有机溶剂/水的处理不能够*洗去硅胶表面吸附的杂质,用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。