采用80%甲醇 0.5ml/min 冲洗 4 小时,再换成分析流动相平衡;如果流动相中含有缓冲盐,请使用过渡流动相过渡后再换分析流动相平衡;
1、建议检测前样品和流动相进行过滤;
2、建议每天做完样品后及时进行清洗;
3、常规检测,测试完后直接把色谱柱反向连接采用90%有机相冲洗45min,最后保存;
4、使用缓冲盐条件:
1)等度条件:使用缓冲盐之前和之后都用过渡流动相以分析流速冲洗45min;
2)梯度条件:使用缓冲盐之前与初始流动相组成相同的过渡流动相以分析流速冲洗 45min;
注意:过渡流动相是指有机相和水相比例与分析流动相相同比例,只是不含有缓冲盐;
3)缓冲盐冲洗干净后,采用90%有机相反向冲洗 60min,最后保存;注意:缓冲盐溶液不能存留色谱柱中过夜;
5、色谱柱的保存
1)短时间内色谱柱的保存
如果使用时间间隔不超过四天,保存到最后的有机溶剂水里面即可。
2)长时间色谱柱的保存
如色谱柱长时间不用,最后采用80%甲醇水用分析流速冲洗45min,将其从HPLC仪中取下,用塑料塞头将其密封,以免色谱柱内溶剂挥发。
1、Ultimate®AQ-C18 色谱柱使用 pH 范围在 1.5~10.0,通常建议使用范围pH为2.0~8.0比较合适,流动相超出pH范围将会导致硅胶基质流失和键合相断裂使柱效下降,使用寿命变短,所以要严格控制pH范围;
2、最高使用温度为60℃ ,建议在40℃以下使用。